9月1日，美军再次对伊朗发动大规模空袭，波及伊朗沿海多省并导致大量平民伤亡。
当晚，伊朗阿巴斯港、格什姆岛等地传出爆炸声。南部霍尔木兹甘省一婚礼现场遭袭，造成4人死亡、50人受伤，遇难者中包含一名儿童。
美军中央司令部当天宣布，美军对伊朗伊斯兰革命卫队的防空阵地、雷达系统、布雷能力以及通信站点等实施新一轮打击。
另据美官员消息，美军在行动中还袭击了两艘伊朗油轮，这是美军首次以“油轮对油轮”的方式，报复伊朗袭击霍尔木兹海峡内船只。
特朗普当天警告称，如果伊朗对此次打击进行报复，美国将再次进行“更猛烈、更高级别”的打击。
他同时否认相关行动意在“迫使伊朗重返谈判桌”，称“不在乎”伊朗是否签署协议。
东方卫视驻美记者李源清表示：“特朗普昨天在社交媒体上宣布，伊朗已经成为一个‘失败国家’，甚至用大写字母写道‘伊朗已经死了’。但今天发生的空袭，恰恰说明伊朗还远没有‘死亡’。美国在军事上拥有明显优势，但伊朗仍然能够向美军基地发射导弹、袭击商船，并利用水雷和岸基武器威胁霍尔木兹海峡。过去一个月，美国因为弹药库存、战争成本以及国内反对声音，逐渐把重点从大规模轰炸转向封锁和经济制裁。但经济压力还没有迫使伊朗接受美国条件，双方就再次回到军事报复。”
当晚，伊朗迅速展开回击，袭击了位于阿联酋、科威特、约旦、巴林和伊拉克境内的多处美军基地。伊方称，击落一架美军MQ-9无人机，并造成多名美方人员死亡。
伊朗军方警告，针对美军的军事行动将继续，直至美方“为其行动感到后悔”；任何与美军合作的国家都必须承担“危险后果”。
李源清指出：“美伊双方都强调自己不希望恢复全面战争，却又都宣称必须对对方的下一次行动作出回应。这种‘有限打击、有限报复、再次打击’的循环，正在让冲突不断自我延续。接下来真正需要观察的，是这些打击能否换来一项新的政治安排。”
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